Post-doctorat : Caractérisation fonctionnelle et structurale des NAD Kinases humaines et pathogènes (H/

Missions :
Approfondir la compréhension de la régulation enzymatique précise des NAD kinases, et en particulier de la forme cytoplasmique humaine.
Activités :
1. Préparer des variants des NAD kinases étudiées par mutagenèse dirigée, urproduction, puri-fication et caractérisation biophysique.
2. Déterminer les structures liées aux ligands des variants et caractériser leur activité enzyma-tique.
3. Proposer des optimisations des inhibiteurs actuels et évaluer la puissance de nouveaux com-posés.
4. Collaborer avec des biologistes sur le mécanisme d’activation des NAD kinases dans les cellules.
Contexte de travail :
Une caractérisation approfondie des NAD kinases est essentielle pour comprendre leur rôle dans la biologie cellulaire. Il a été démontré que les NAD kinases bactériennes sont essentielles et représentent des cibles thérapeutiques prometteuses. Des avancées plus récentes ont suggéré le rôle des NAD kinases humaines dans l’apparition du cancer et les processus de métastase.
Dans notre groupe, nous avons défini la superfamille d’enzymes à laquelle appartiennent les NAD kinases. Depuis, nous avons résolu de nombreuses structures, ce qui nous a permis de proposer puis de confirmer un mécanisme original de catalyse basé sur le substrat, partagé par les NAD kinases bactériennes et humaines. Nous avons également utilisé une approche originale de criblage de fragments pour concevoir des inhibiteurs puissants.
Plus récemment, nous avons résolu la première structure de la NAD kinase cytoplasmique hu-maine dans sa forme active. Nous avons démontré plusieurs niveaux de régulation par ses ex-tensions N- et C-terminales.
Ce projet post-doctoral vise à approfondir la compréhension de la régulation enzymatique pré-cise des NAD kinases, et en particulier de la forme cytoplasmique humaine. Ces études s’appuieront sur de nombreuses techniques de biologie structurale, telles que la cristallographie aux rayons X, le SAXS, la cryo-microscopie électronique, la RMN et la RPE. Des expériences d’enzymologie résolues dans le temps permettront de révéler des étapes intermédiaires importantes dans le cycle catalytique. Les effecteurs allostériques seront caractérisés, de même qu’une éventuelle régulation par interaction avec les membranes. Les changements conformationnels et la flexibilité seront explorés à l’aide de techniques complémentaires (SAXS, RPE, affinement d’ensembles, cryo-EM, etc.).

Environnement:
Le CBS est un institut de recherche dynamique doté d’infrastructures exceptionnelles couvrant l’ensemble des techniques de biologie structurale et de biophysique, notamment la RMN, la cristallographie aux rayons X, la cryo-microscopie électronique, la microscopie de fluorescence avancée et à super-résolution, la manipulation de molécules uniques, la biologie moléculaire et cellulaire, ainsi que le calcul haute performance. Cette richesse technologique permet de mener des projets scientifiques ambitieux grâc
Voir plus sur le site emploi.cnrs.fr...