Ingénieur en techniques biologiques H/F

L’ingénieur d'étude aura pour mission principale de mettre en place et/ou réaliser des expérimentations in vitro, ex vivo et in vivo sur divers modèles murins afin de participer aux projets scientifiques de l'équipe « Inflammasomme NLRP3 et réponse immunitaire au sepsis » à laquelle il/elle sera rattaché(e), mais également d’apporter un soutien en expérimentation animale aux autres équipes du CIRI et de la SFR Biosciences.

La personne recrutée aura pour activité principale à hauteur de 60% de son temps de participer aux différents projets scientifiques de l'équipe « Inflammasome NLRP3 et réponse immunitaire au sepsis » dans les projets d'expérimentation animale sur la souris in vivo et ex vivo à partir de matériel prélevé sur ces modèles, mais également sur des aspects de biologie cellulaire et moléculaire en fonction des besoins. L’équipe est encadrée par 1 chercheur et 2 personnels hospitalo-universitaires. Ses projets visent à comprendre (1) les mécanismes biochimiques et cellulaires de régulation de l’inflammasome NLRP3, un complexe de signalisation contrôlant l’inflammation, (2) l’impact de la voie NLRP3 in vivo dans la réponse au sepsis, aux maladies métaboliques (diabète) et neurodégénératives, et (3) la réponse innée anti-bactérienne.
Ses compétences en expérimentation cellulaire et animale seront mutualisées au profit des autres équipes du CIRI (20% de son temps) et de l'UAR3444 SFR Biosciences utilisant la même animalerie (20% de son temps). Quand nécessaire, il/elle prendra en charge des expérimentations animales au niveau A1, A2 et A3, assurant leur continuité et stabilité dans le temps, notamment pour les équipes n’ayant pas de personnels techniques permanents qualifiés en expérimentation animale. Il/elle participera à la formation pratique des membres du CIRI.

I. Expérimentation (les projets scientifiques évolueront au cours du temps)
A) Expérimentation in vivo dans des modèles murins. 1) Sepsis : choc endotoxique, modèle chirurgical de «ligature et ponction caecale », arthrite (injection de cristaux de monosodium urate), 2) Maladie métabolique : diabète induit par régime riche en gras (suivi de poids, glycémie, masse grasse/maigre, prise de nourriture, tests de résistance au glucose et insuline de souris sous régime riche en gras), 3) Maladie neurodégénérative : neuroinflammation, analyse de comportement, 4) infections bactériennes et virales (infection intranasale, suivi de charges bactériennes ou virales, analyse de la réponse immune).

B) Expérimentation ex vivo dans des modèles murins. Culture de macrophages dérivés de moelle osseuse ou péritonéaux, préparation de microglies et astrocytes primaires, splénocytes, analyse ex vivo de la réponse inflammatoire à différents stimuli, co-cultures, mise en place de cultures organotypiques

C) Biologie cellulaire, moléculaire et biochimie. Sous-clonage de gènes et construction de mutants. Génération de lignées cellulaires par transfection, transduction, CRISPR/Cas9. Test foncti