Assistant Ingénieur en Biologie Moléculaire et Cellulaire (H/F)

Missions :
Sous la responsabilité du Dr. Francois Foulquier et du Dr. Maxence Noel, vous serez pleinement intégré·e au développement du projet financé par la Fondation pour la Recherche sur le Cerveau (FRC). Votre mission principale consistera à assurer la génération de neurones issus d’iPSCs et de produire des vecteurs plasmidiques afin de réaliser des approches de knock-out par CRISPR/Cas9 nécessaires à la bonne réalisation de ce projet.
Activités :
1. Biologie Moléculaire & Génération de Plasmides (Env. 30% du temps)
• Conception et réalisation de clonages moléculaires
• Transformation de bactéries compétentes et amplification de l'ADN plasmidique (MaxiPrep et glycerol stock).
• Contrôle qualité des constructions (digestions de restriction, PCR, analyse et validation des résultats de séquençage Sanger).
• Gestion et mise à jour de la plasmidothèque de l'équipe.
2. Culture Cellulaire (Env. 40% du temps)
• Entretien, génération et congélation de cellules iPSCs, de précurseurs neuronaux et de neurones matures générés par dual-SMAD inhibition.
• Fixation et marquage de cellules pour analyses par microscopie.
• Réalisation de transfections transitoires de cellules HEKs et sélection de clones transfectées par puromycine pour réalisation de CRISPR/Cas9 knock-out.
• Préparation des milieux de culture et des réactifs associés dans le respect des règles de stérilité (PSM).
3. Analyse biochimique et moléculaire (Env. 20% du temps)
• Analyse d’expression de gènes par qPCR.
• Analyse d’expression protéique par Western-blot
4. Vie du laboratoire & Traçabilité (Env. 10% du temps)
• Tenue rigoureuse du cahier de laboratoire (physique ou électronique).
• Participation à la gestion des stocks de consommables et réactifs liés à votre activité.
• Application et respect strict des consignes d'hygiène et de sécurité (H&S) en environnement de type L1 et L2.

Contexte de travail :
Le poste proposé se situe au sein de l’Unité de glycobiologie Structurale et Fonctionnelle (UGSF), dans l’équipe du Dr. Francois Foulquier. L’UGSF est un institut internationalement reconnu pour ses travaux sur les Glycosciences et est composé de plusieurs équipes inter-disciplinaires. L’équipe du Dr. Foulquier se base sur l’utilisation de cellules de patients développant des troubles congénitaux de la glycosylation (CDG) et vise à combiner recherche fondamentale et recherche translationnelle dans le but de mieux comprendre les mécanismes de glycosylation et de développer des approches thérapeutiques novatrices afin d’améliorer la qualité de vie des patients.
Dans ce contexte, le poste sera associé au nouvel axe développé dans l’équipe du Dr. Foulquier centré sur la compréhension des voies de glycosylation présentes au sein du neurone en se basant sur MAN2C1-CDG où la dégradation des N-glycannes par la voie ERAD est perturbée. Ce projet vise à démontrer l’importance de cette voie de dégradation dans les voies de biosynthèse des N-glycannes au sein du neurone.