Assistant Ingénieur H/F Limites fonctionnelles des mécanismes de surveillance de l'intégrité de l'ADN e

Missions :
Ce projet de recherche vise à mieux comprendre les mécanismes cellulaires qui permettent l’adaptation à la signalisation dépendante de la voie ATR Chk1 lors de situations de stress réplicatif. Ces mécanismes jouent un rôle central dans la préservation de l’intégrité du génome, mais peuvent également contribuer à l’apparition d’une instabilité génétique lorsque leur fonctionnement est altéré. Le projet s’appuie sur des approches de biologie cellulaire, de biologie moléculaire et d’imagerie quantitative afin d’identifier les limites fonctionnelles des systèmes de surveillance de l’ADN et leur implication dans les processus de transformation cellulaire
Activités :
La personne recrutée participera activement aux travaux expérimentaux du projet et aura pour principales missions de :
Générer et caractériser des lignées cellulaires génétiquement modifiées exprimant de façon stable des senseurs des points de contrôle de l’intégrité de l’ADN ainsi que différents marqueurs fluorescents constitutifs ou inductibles.
Étudier la régulation et le fonctionnement des mécanismes de surveillance de l’ADN dans des conditions physiologiques et après induction de stress génotoxiques.
Mettre en œuvre des expériences de vidéo-microscopie sur cellules vivantes associées à différentes approches de perturbation fonctionnelle, notamment par traitements pharmacologiques ou déplétion par siRNA.
Réaliser des marquages cellulaires par immunofluorescence et par Proximity Ligation Assay (PLA).
Effectuer l’analyse quantitative d’images issues d’expériences de microscopie sur cellules vivantes ou fixées afin d’évaluer les conséquences des perturbations expérimentales sur le devenir cellulaire, la réponse aux dommages de l’ADN et l’accumulation de lésions.
Réaliser des préparations chromosomiques de type « metaphase spread » et analyser les anomalies chromosomiques.
Présenter et discuter les résultats obtenus lors des réunions d’équipe, séminaires internes et externes à l'unité, en français et en anglais.

Contexte de travail :
L’équipe d’accueil appartient à l’unité mixte de recherche UMR9019 CNRS "Intégrité des Génomes et Cancers ", située sur le campus de l’Institut Gustave Roussy à Villejuif, à proximité immédiate de Paris et accessible par la ligne 14 du métro. L’Institut Gustave Roussy est reconnu comme l’un des principaux centres européens de recherche et de prise en charge du cancer.
L’environnement scientifique bénéficie d’infrastructures technologiques de premier plan comprenant des plateformes d’imagerie sur cellules vivantes (microscopie vidéo, confocale, spinning disk et super-résolution), d’imagerie intravitale, de cytométrie en flux, de génomique et de bio-informatique.
La personne recrutée intégrera un environnement de recherche dynamique et multidisciplinaire réunissant plusieurs équipes spécialisées dans l’étude des mécanismes assurant la stabilité du génome ainsi que le contrôle de la réplication et de la réparation de l’ADN.